摘要
實(shí)驗(yàn)室使用不同的方法檢測眾多的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目。了解檢測所使用的方法可以對檢測結(jié)果有更深刻更廣泛的認(rèn)識。以下是對幾種常見的實(shí)驗(yàn)室檢測方法的解釋和說明。
內(nèi)容
實(shí)驗(yàn)室使用不同的方法檢測眾多的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目。了解檢測所使用的方法可以對檢測結(jié)果有更深刻更廣泛的認(rèn)識。以下是對幾種常見的實(shí)驗(yàn)室檢測方法的解釋和說明。
實(shí)驗(yàn)室檢測方法的建立是涉及生物學(xué)、化學(xué)和物理學(xué)等科學(xué)的理論基礎(chǔ),并涵蓋從檢測血液中膽固醇的含量、到分析DNA、再到培養(yǎng)可能導(dǎo)致感染的微生物病原體的臨床實(shí)驗(yàn)室等所有方面。這些方法與烹飪方法很相似,用于確定待測生物樣品中的特定組份。實(shí)驗(yàn)室工作人員遵循程序一步步操作,直到得到最終結(jié)果。
像一些食譜一樣,有些方法比其他方法更復(fù)雜,并且需要不同程度的專業(yè)知識。通常情況下,同一物質(zhì)可以有一種以上的方法被用于檢測。因此,在不同的實(shí)驗(yàn)室同一樣品可能使用不同的檢測方法,在比對檢測結(jié)果時,事實(shí)是至關(guān)重要的。
以下所羅列出的一些方法嘗試對一些科學(xué)的檢測原理和得出結(jié)果所必須的一些步驟進(jìn)行說明。對一些方法及其之間差異的解釋說明,能更好地讓你理解以后會使用到的檢測試驗(yàn)。這些項(xiàng)目的目的并不是要提供一個全面的可使用的方法,但是這些項(xiàng)目確實(shí)能夠代表這里將提及的一些方法。
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免疫學(xué)檢測
免疫球蛋白是由免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的一種能對體內(nèi)外來物質(zhì)識別、結(jié)合、消除的蛋白質(zhì)。免疫學(xué)檢測的基礎(chǔ)是在免疫球蛋白(抗體)與其特異識別的物質(zhì)(外來分子,稱為抗原)之間進(jìn)行特異性結(jié)合。免疫學(xué)檢測可應(yīng)用于檢測血液或其他體液中是否有特異性抗體或特異性抗原的存在。
當(dāng)免疫學(xué)檢測方法用于檢測血液或體液中是否存在抗體時,那么檢測試驗(yàn)中需要一個特異性抗原作為檢測系統(tǒng)的一部分。如果被檢測樣品中存在抗體,那么它將與檢測系統(tǒng)中的抗原反應(yīng)或結(jié)合,檢測結(jié)果也呈現(xiàn)陽性。如果沒有明顯的反應(yīng),測試結(jié)果為陰性。免疫學(xué)檢測抗體的應(yīng)用包括類風(fēng)濕因子(該試驗(yàn)檢測類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者中是否存在自身免疫性抗體)、西尼羅河病毒(該試驗(yàn)檢測受感染的患者體內(nèi)是否存在該病毒抗體)及一些預(yù)防接種后產(chǎn)生的抗體(如檢測乙肝表面抗體,以確保乙肝疫苗接種是成功的)。
當(dāng)免疫學(xué)檢測方法檢測血液或體液中是否存在抗原時,檢測中包含與抗原相對應(yīng)的抗體。患者樣品中出現(xiàn)的抗原與特異性抗體的反應(yīng)與一些已知的反應(yīng)濃度進(jìn)行比較,最后得出抗原的濃度含量。免疫學(xué)檢測抗原的應(yīng)用試驗(yàn)包括檢測藥物濃度(如地高辛、萬古霉素)、激素(如胰島素、甲狀腺激素、雌激素)和腫瘤標(biāo)志物(如PSA、CA125和AFP)。
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酶聯(lián)免疫檢測
這是免疫學(xué)檢測的方法之一。其檢測原理為抗體與特異性抗原結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物,再通過酶標(biāo)記的抗原或抗體來檢測這些復(fù)合物。
為檢測患者血液中某一抗體,一個已知的抗原需要附著在固相載體表面,然后加入含有病人標(biāo)本的溶液。如果病人的樣本中含有抗體,那么它就會與抗原結(jié)合。隨后添加酶標(biāo)記的第二抗體(抗人抗體)。如果酶標(biāo)記的抗體與抗人抗體結(jié)合,那么酶將會發(fā)生一些可檢測到的變化,表明病人樣本中存在相對應(yīng)的抗體和該抗體的含量。
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這是一種免疫學(xué)檢測方法來檢測病人血液或組織中一些特定的蛋白質(zhì)。它整合了電泳的步驟,將特定的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到薄膜上。蛋白質(zhì)印跡檢測方法往往作為一個確診試驗(yàn)以確認(rèn)抗體的存在,并作為診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。其應(yīng)用的例子包括艾滋病和萊姆病的確診試驗(yàn)。
進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡試驗(yàn)時,沿著凝膠的一端加入含有蛋白質(zhì)的樣品。多個樣品及一個質(zhì)控品可并肩加入在凝膠一端不同的“泳道”中。通過電流,可以使樣品中的蛋白質(zhì)在凝膠介質(zhì)中移動,根據(jù)蛋白質(zhì)大小和形狀的不同進(jìn)行分離,最終形成類似梯子樣的條帶。這些樣品和質(zhì)控品形成的梯子樣條帶隨后通過薄膜與凝膠的接觸,轉(zhuǎn)移到薄膜上。標(biāo)記的抗體在隨后的一到兩個步驟中被用于檢測薄膜上是否存在結(jié)合的蛋白質(zhì)。例如,在艾滋病或萊姆病確診檢測中,分離的蛋白質(zhì)實(shí)質(zhì)是病原體。病人的樣本加入以雜交,任何針對病原體的的抗體都會被結(jié)合,最后通過被標(biāo)記的針對人免疫球蛋白抗體來檢測。某些蛋白質(zhì)的出現(xiàn)可以通過與其他泳道質(zhì)控品陽性或陰性的對比進(jìn)行判斷說明。
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