離子色譜法同肘測定糖類和有機酸
發(fā)布于 2013/12/17閱讀(1174)來源 zxj標(biāo)簽 離子色譜
摘要
本文介紹用電導(dǎo)和脈沖安培檢測的離子色譜同時測定一元有機酸和糖類的方法.
內(nèi)容
離子色譜法(IC)是一種十分有用的技術(shù),它可以進行痕量無機陰離子、無機陽離子和有機酸的測定。用抑制型離子色譜法測定有機酸已有過報道 一元有機酸如乳酸、乙酸. 乙醇酸、甲酸、丙酮酸能通過陰離子交換柱分離,然后以抑制電導(dǎo)法靈敏地進行檢測。
脈沖安培檢測器是離子色譜法的一種新的檢測技術(shù),對于易氧化的物質(zhì),特別是多羥基物質(zhì)和糖類,是很有用的測定手段。脈沖安培檢測器與高效陽離子交換柱結(jié)合,為糖類的測定提供了快速, 方便和靈敏的分析方法。
本文描述的離子色譜系統(tǒng)在脈沖安培檢測之后再串連化學(xué)抑制器進行電導(dǎo)檢測, 以此對糖類和一元有機酸包括甘露醇,鼠李糖,葡萄糖,果糖、乳糖、蔗糖,棉子糖、麥芽糖、乳酸, 己醇酸、甲酸 丙酮酸進行同時測定。
實驗部分
(一)儀器和試劑
Dionex 4000i型離子色譜儀, 配以電導(dǎo)檢測器和金電極脈沖安培檢測器,Dioncx HPLC-AG6和HPLC-AS6色譜柱。Houston Instruments雙筆記錄儀,HP4270積分儀。Dionex AMMS微膜抑制器。
各溶液, 包括離子色譜淋洗液, 均以分析純試劑和二次去離子水配制。
(=)色落條件
淋洗液0.080mol/L NaOH, 流速I m1/miI1,保護柱HPIC—AG6,分離柱HPIC-AS6,抑制柱AMMS,再生液50mmol/L H2SO4,流速5.0ml/min進樣體積50μl檢測電勢E10.20V,持續(xù)時問t1:60ms正清洗電勢E2:0.60V,持續(xù)時間t2:60ms, 負清洗電勢Es持續(xù)時間t3:3240ms。
(三)測定方法
在色譜開始進行之前, 先用電導(dǎo)檢測以確認在不同淋洗掖時各一元有機酸的保留時間。由于選擇的淋洗液濃度較大,必須對淋洗液、再生液和各自的流速進行優(yōu)化以提供低的背景電導(dǎo)和好的基線。然后,連接各組件,將脈沖安培檢測器連在系統(tǒng)內(nèi),以測定各糖類。
結(jié)果與討論
(一)穩(wěn)定性和重現(xiàn)性
對混合十三個組分的標(biāo)準(zhǔn)溶液測定其穩(wěn)定性和重現(xiàn)性,連續(xù)測定九次。
看出峰高和保留時間均有良好的重現(xiàn)性。不同一天測定時, 也沒有顯著差異。
(二)檢測限,線性范圍和線性關(guān)系
從結(jié)果看用離子色譜法測定以上各物不僅有很低的檢測限,而且有很寬的線性范圍。以峰面積積分值計算,各酸類在0~100μg/ml時的線性關(guān)系。
同樣濃度下,對葡萄糖、果糖, 蔗糖以峰高計算其線性關(guān)系如下t葡萄糖Y=1.60c+2.70,r= 0.9997。
從以上結(jié)果看, 各組分均有良好的線性關(guān)系, 因此用離子色譜法測定時,準(zhǔn)確度較好。
(三)各組分的色譜分離情況
按照上述標(biāo)準(zhǔn)條件測定, 典型的色譜圖可見五種酸到達電導(dǎo)檢測器時, 基本不發(fā)生重疊現(xiàn)象。而用脈沖安培檢測糖類時,甘露醇與鼠李糖、葡萄糖與果糖、乳糖與蔗糖之間有部分重疊, 但對測定結(jié)果影響不大。值得注意的是,當(dāng)乙酸存在時,乙酸稻乳酸將發(fā)生重疊, 難以分辨。
應(yīng)用實例
用此法測定飲料中的糖類和一元有機酸十分方便, 一般不必經(jīng)過特定的前處理, 只要稀釋后通過0.45μm的濾膜直接進樣,便可進行測定。我們對黃酒和啤酒進行了測定。
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