Diamonsil(鉆石二代)分析色譜柱詳細(xì)介紹:
A?色譜柱驗收
檢查外觀是否完好;
檢查柱子的規(guī)格型號,是否與您的需求相符;
如果您想對新色譜柱的性能進(jìn)行測試,可以按照柱性能測試報告上的條件進(jìn)行測試。
B 色譜柱安裝
該色譜柱與外徑為1/16英寸的PEEK管線或不銹鋼管線好匹配;
為減小死體積,柱前和柱后的管線內(nèi)徑應(yīng)不超過0.01 英寸(0.25 mm);
如果您使用的是PEEK管線,您應(yīng)選擇PEEK接頭使管線與色譜柱連接;如果您使用的是不銹鋼管線,您可以選擇PEEK接頭或不銹鋼接頭,當(dāng)使用不銹鋼接頭時,應(yīng)確保管線與柱頭緊密結(jié)合后再固定韌環(huán),這樣可以防止管線與色譜柱連接處產(chǎn)生死體積。
C 對流動相的要求
該反相色譜柱,可以使用水或有機(jī)溶劑作為流動相,并且為了特殊需要還可以在流動相中加入酸、堿、鹽;
該色譜柱不能耐受純水或純水溶液,流動相中有機(jī)相的比例不應(yīng)低于5%;
該色譜柱的pH值耐受范圍為1.5-9.0,流動相的pH值不應(yīng)超過這一范圍,否則色譜柱性能和壽命會受到影響;
對于緩和流動相,應(yīng)確保不同溶劑間的良好互容,以免影響分析結(jié)果;
對于有機(jī)溶劑-緩沖溶液體系,應(yīng)確保緩沖鹽不會析出;
不同流動相的黏度有差別,使用不同的流動相時,色譜柱產(chǎn)生的壓強(qiáng)會有差別;使用水(包括緩沖溶液)-乙腈體系時,乙腈含量為20%時產(chǎn)生的壓強(qiáng)*大;使用水(包括緩沖溶液)-甲醇體系時,甲醇含量為50%時產(chǎn)生的壓強(qiáng)*大;Diamonsil 2的*高承受壓強(qiáng)遠(yuǎn)高于反相模式下可能產(chǎn)生的*高壓強(qiáng);
在10-40 °C之間,使用較高的柱溫能夠降低色譜柱壓強(qiáng)并改善分離效果;
用于流動相配制的溶劑應(yīng)為HPLC級或更高級別,作為添加物的酸、堿、鹽盡量使用HPLC級別;
色譜柱入口和出口安裝了2 μm篩板,為避免色譜柱堵塞,流動相應(yīng)經(jīng)0.45 μm濾膜或孔徑更小的濾膜過濾;
流動相應(yīng)該有效脫氣后再使用,以避免在系統(tǒng)中產(chǎn)生氣泡導(dǎo)致的泵和檢測器不穩(wěn)定;
純水或緩沖鹽水溶液易滋生微生物造成流動相污染,純水或緩沖鹽水溶液作為流動相組分時,24小時內(nèi)應(yīng)更換新的溶液。
D 轉(zhuǎn)換流動相的注意事項
您收到的色譜柱是保存在65%乙腈水溶液中的,使用前建議您用甲醇或乙腈對新色譜柱進(jìn)行活化沖洗;
純有機(jī)溶劑或有機(jī)溶劑含量較高的流動相與含緩沖鹽的流動相變換,不應(yīng)直接替換,兩者之間應(yīng)使用10%甲醇水溶液或10%乙腈水溶液進(jìn)行過渡,過渡溶劑體積不少于10倍柱體積;
用某一種流動相代替上一種流動相時,應(yīng)確保兩者互容;
E 色譜柱保存
超過24小時的時間不使用色譜柱,*好將色譜柱保存在乙腈或甲醇中;
操作時的流動相中若無酸、堿、鹽,可以用乙腈或甲醇沖洗20倍柱體積后直接封存;操作時的流動相中若有酸、堿、鹽,應(yīng)先用10%甲醇水溶液或10%乙腈水溶液沖洗20倍柱體積,然后再用乙腈或甲醇沖洗,然后封存;
使用隨色譜柱一起的PEEK螺旋塞將色譜柱的入口和出口密封,以防止柱中溶劑揮發(fā)。
F 對樣品的要求
用于進(jìn)樣的樣品溶液須經(jīng)0.45 μm濾膜或孔徑更小的濾膜過濾
如果樣品提取自復(fù)雜基質(zhì)(比如動植物基質(zhì)),*好對提取液進(jìn)行適當(dāng)?shù)募兓幚恚员苊馕廴旧V柱,影響分析效果和色譜柱壽命
安裝保護(hù)柱可以防止顆粒物堵塞色譜柱,并預(yù)先吸附強(qiáng)保留物質(zhì),以避免其污染色譜柱。
G 色譜柱再生方法
當(dāng)色譜柱壓強(qiáng)明顯升高時可對色譜柱進(jìn)行再生處理;用相當(dāng)于20倍柱體積的溶劑按下列次序沖洗色譜柱:10%甲醇水溶液→甲醇→異丙醇→甲醇。該程序適用于反相色譜柱:C18, C8, PH, CN。如果色譜柱的壓力升高是由顆粒雜質(zhì)堵塞引起,再生處理效果不明顯。
柱床體積計算方法:V=3.14*d2*L/4
d為色譜柱內(nèi)徑,單位為cm;L為柱長,單位為cm。