島津LC10AT型高效液相色譜儀操作規(guī)程
島津LC-10AT型高效液相色譜儀操作規(guī)程
1.目的
規(guī)范島津LC-10AT型高效液相色譜儀的使用。
2.范圍
適用于島津LC-10AT型高效液相色譜儀的使用。
3.職責(zé)
質(zhì)檢員對(duì)本規(guī)程的實(shí)施負(fù)責(zé)。
4.規(guī)程
4.1 系統(tǒng)組成：本系統(tǒng)由2個(gè)LC-10ATvp溶劑輸送泵(分主/A泵和副/B泵)、Rheodyne 7725i手動(dòng)進(jìn)樣閥、SPD-10Avp紫外-可見檢測(cè)器、N2000色譜數(shù)據(jù)工作站和電腦等組成，另外還包括打印機(jī)、不間斷電源等輔助設(shè)備。
4.2 準(zhǔn)備
4.2.1 準(zhǔn)備所需的流動(dòng)相，用合適的0.45μm濾膜過濾，超聲脫氣20min。
4.2.2 根據(jù)待檢樣品的需要更換合適的洗脫柱(注意方向)和定量環(huán)。
4.2.3 配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液(也可在平衡系統(tǒng)時(shí)配制)，用合適的0.45μm濾膜過濾。
4.2.4 檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常。
4.3 開機(jī)：接通電源，依次開啟不間斷電源、B泵、A泵、檢測(cè)器，待泵和檢測(cè)器自檢結(jié)束后，打開打印機(jī)、電腦顯示器、主機(jī)，最后打開色譜工作站。
4.4 參數(shù)設(shè)定
4.4.1 波長(zhǎng)設(shè)定：在檢測(cè)器顯示初始屏幕時(shí)，按[func]鍵，用數(shù)字鍵輸入所需波長(zhǎng)值，按[Enter]鍵確認(rèn)。按[CE]鍵退出到初始屏幕。
4.4.2 流速設(shè)定：在A泵顯示初始屏幕時(shí)，按[func]鍵，用數(shù)字鍵輸入所需的流速(柱在線時(shí)流速一般不超過1ml/min)，按[Enter]鍵確認(rèn)。按[CE]鍵退出。
4.4.3 流動(dòng)相比例設(shè)定：在A泵顯示初始屏幕時(shí)，按[conc]鍵，用數(shù)字鍵輸入流動(dòng)相B的濃度百分?jǐn)?shù)，按[Enter]鍵確認(rèn)。按[CE]鍵退出。
4.4.4 梯度設(shè)定
4.4.4.1 在A泵顯示初始屏幕時(shí)，按[edit]鍵，[Enter]鍵;
4.4.4.2 用數(shù)字鍵輸入時(shí)間，按[Enter]鍵，重復(fù)按[func]鍵選擇所需功能(FLOW設(shè)定流速，BCNC設(shè)定流動(dòng)相B的濃度)，按[Enter]鍵，用數(shù)字鍵輸入設(shè)定值，按[Enter]鍵;
4.4.4.3 重復(fù)上一步設(shè)定其它時(shí)間步驟;
4.4.4.4 用數(shù)字鍵輸入停止時(shí)間，重復(fù)按[func]鍵直至屏幕顯示STOP，按[Enter]鍵。按[CE]鍵退出。
4.5 更換流動(dòng)相并排氣泡
4.5.1 將A/B管路的吸濾器放入裝有準(zhǔn)備好的流動(dòng)相的儲(chǔ)液瓶中;
4.5.2 逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)A/B泵的排液閥180°，打開排液閥;
4.5.3 按A/B泵的[purge]鍵，pump指示燈亮，泵大約以9.9ml/min的流速?zèng)_洗，3min(可設(shè)定)后自動(dòng)停止;
4.5.4 將排液閥順時(shí)針旋轉(zhuǎn)到底，關(guān)閉排液閥。
4.5.5 如管路中仍有氣泡，則重復(fù)以上操作直至氣泡排盡。
4.5.6 如按以上方法不能排盡氣泡，從柱入口處拆下連接管，放入廢液瓶中，設(shè)流速為5ml/min，按[pump]鍵，沖洗3min后再按[pump]鍵停泵，重新接上柱并將流速重設(shè)為規(guī)定值。
4.6 平衡系統(tǒng)
4.6.1 按《N2000色譜數(shù)據(jù)工作站操作規(guī)程》打開“在線色譜工作站”軟件，輸入實(shí)驗(yàn)信息并設(shè)定各項(xiàng)方法參數(shù)后，按下“數(shù)據(jù)收集”頁的 [查看基線] 按鈕。
4.6.2 等度洗脫方式
4.6.2.1 按A泵的[pump]鍵，A、B泵將同時(shí)啟動(dòng)，pump指示燈亮。用檢驗(yàn)方法規(guī)定的流動(dòng)相沖洗系統(tǒng)，一般最少需6倍柱體積的流動(dòng)相。
4.6.2.2 檢查各管路連接處是否漏液，如漏液應(yīng)予以排除。
4.6.2.3 觀察泵控制屏幕上的壓力值，壓力波動(dòng)應(yīng)不超過1MPa。如超過則可初步判斷為柱前管路仍有氣泡，按4.5.6操作。
4.6.2.4 觀察基線變化。如果沖洗至基線漂移<0.01mV/min，噪聲為<0.001mV時(shí)，可認(rèn)為系統(tǒng)已達(dá)到平衡狀態(tài)，可以進(jìn)樣。
4.6.3 梯度洗脫方式
4.6.3.1 以檢驗(yàn)方法規(guī)定的梯度初始條件，按4.6.2項(xiàng)下方法平衡系統(tǒng)。
4.6.3.2 在進(jìn)樣前運(yùn)行1~2次空白梯度。方法：按A泵的[run]鍵，prog.run指示燈亮，梯度程序運(yùn)行;程序停止時(shí)，prog.run指示燈滅。
4.7 進(jìn)樣
4.7.1 進(jìn)樣前按檢測(cè)器[zero]鍵調(diào)零，按軟件中 [零點(diǎn)校正] 按鈕校正基線零點(diǎn)，再按一下 [查看基線] 按鈕使其彈起。
4.7.2 用試樣溶液清洗注射器，并排除氣泡后抽取適量。