HP1100液相色譜儀使用操作規(guī)程

1． 電源準(zhǔn)備
打開穩(wěn)壓器（ ）電源開關(guān)，須待電壓指示至 220V 后，才能開啟其他有關(guān)設(shè)備。
2． HP1100 高效液相色譜儀的準(zhǔn)備 
   
    試劑：三氟乙酸 
    乙腈(Fisher 公司產(chǎn)品色譜純)
    超純水(Millipore 超純水)
    冰乙酸
    溶液配置：貯液瓶與流動(dòng)相的準(zhǔn)備
    A 液 0.1%三氟乙酸 （三氟乙酸 1ml，超純水 999ml）室溫保存
    B 液 60%乙腈 （乙腈 600ml， 超純水 400ml）室溫保存
    樣品液 0.01%乙酸 （冰乙酸 10 　 l 超純水 100ml）室溫保存
    泵頭沖洗液：精濾后超純水或者是 1%色譜純甲醇 室溫保存
    注：貯液瓶應(yīng)用超純水淌洗干凈，備用。
    流動(dòng)相溶劑用潔凈 G4 玻沙漏斗精濾除去微小顆粒（目前未濾過溶液）。 
    操作者必須清楚并注明 A、B 貯液瓶盛裝為何種溶劑。
    沖 洗 泵 頭 ： 用 注 射 管 于 軟 塑 料 管 末 端 抽 吸 至 有 水 流 出 ， 調(diào) 節(jié) 流 速 開 關(guān) 控 制 流 速 為20-30drop/min.（目前我們很少?zèng)_泵頭。）
    ① 流動(dòng)相管道排氣
    如果，管道中氣泡較多，可通過彈擊管道，排除氣泡，并逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)脫氣泵活塞使其松動(dòng)，用注射管于流動(dòng)相出口的塑料管末端抽吸至管道內(nèi)氣泡排除完全。操作時(shí)，我們通常已經(jīng)打開了脫氣機(jī)（氣泡嚴(yán)重影響分離效果，所以觀察管道中液體是否有氣泡非常重要。）
    ② 開機(jī)
    ③ 進(jìn)入 HP1100 操作系統(tǒng)
    a.雙擊 WIN-95 操作界面中左下角 Instrument 1 online 圖標(biāo)，進(jìn)入 HP1100 工作站軟件操作界面。單擊工作站操作界面上方 Run control 菜單，在下拉菜單中找到 Sample Info 子菜單，單擊。在 Sample Info 信息框內(nèi)定義操作者、樣品前綴及編號(hào)、保存路徑等參數(shù)。在保存路徑項(xiàng)下，將可定義子目錄分別輸入操作者拼音縮寫，以方便檢索時(shí)互不干擾。
    b.等待工作站操作界面中泵、柱溫箱、檢測器各指示圖標(biāo)由灰色轉(zhuǎn)變?yōu)榫G色后，單擊泵、檢測器各圖標(biāo)可從其各自彈出的菜單中設(shè)定流動(dòng)相各溶劑比例、流速等。
     （1） 流速通常為 1ml/min。檢測波長通常為 280，或者 254nm。
     （2） A 液設(shè)置為 100%，運(yùn)行 15-30 分鐘（目的是色譜柱的預(yù)平衡），觀察基線走勢，基線應(yīng)為直線，通過單擊“Balance”鍵可將基線調(diào)至零點(diǎn)。待基線平穩(wěn)后可進(jìn)樣。 
     （3） 調(diào)整 A 液為 0，B 液為 100%再運(yùn)行 60 分鐘（此時(shí)乙腈實(shí)際濃度為 60%）
      （4） 在 A 液沖洗同時(shí)進(jìn)行進(jìn)樣環(huán)的沖洗：用 500ul 的針樣注射器，在 load 狀態(tài)，注入超純水 500ul。（反復(fù)三次，若是 20ul 進(jìn)樣環(huán)，則加入 20ul 以上，多余的水可廢液管流出。通常同一樣品上樣 30 次后應(yīng)沖洗進(jìn)樣環(huán)，如果不同樣品，最好，每次上樣前均進(jìn)行沖洗。）
     （5） 吸取一定量可直接進(jìn)樣的樣品溶液（上樣液最好用濾器濾過），將進(jìn)樣閥逆時(shí)針旋至Load 檔，將進(jìn)樣針從進(jìn)樣孔處水平推入，按進(jìn)樣器活塞將樣品溶液注射入進(jìn)樣環(huán)后，立即將進(jìn)樣閥順時(shí)針方向旋至 Inject 檔，與此同時(shí)，數(shù)據(jù)開始自動(dòng)收集。
     （6） 此時(shí)樣品分析已經(jīng)完成。在 HP1100 主操作界面的檢測器圖標(biāo)，關(guān)閉檢測器，然后關(guān)閉色譜儀主機(jī)檢測器開關(guān)（目的是延長檢測器壽命）。將 B 通道調(diào)為 0，A 通道調(diào)為 100%，即 A 液沖洗色譜柱約 10-30min。用 A 液續(xù)沖洗色譜柱約 10-30m（目的是沖出柱內(nèi)殘留的雜質(zhì)）
     （7） A 通道換為 C 通道（100%乙腈）續(xù)沖洗色柱約 10-30min。（目的主要為保護(hù)柱）
    ④ 數(shù)據(jù)記錄的終止與保存
    電腦將自動(dòng)收集并保存數(shù)據(jù)，終止運(yùn)行后，將自動(dòng)彈出數(shù)據(jù)框，或者可通過 DATA ANALYSIS菜單，調(diào)出資料。 
3． 圖譜處理
4． 關(guān)機(jī)
    1） HP1100 的關(guān)閉
    在 HP1100 的主操作界面上分別單擊關(guān)閉泵、檢測器圖標(biāo)，或通過菜單關(guān)閉 。然后，單擊HP1100 的主操作界面右上方“X”，退出 Instrument 1 online 程序，返回至 WIN-95 操作界面。單擊左下角“Start”菜單，單擊“Shut down”,等待關(guān)機(jī)，待出現(xiàn)“Restart”提示后，按電腦主機(jī)電源鍵，關(guān)閉電腦主機(jī)及顯示器。將所有使用儀器用布蓋好。關(guān)閉排氣扇、空調(diào)與穩(wěn)壓器開關(guān)。
    2） 清潔衛(wèi)生
    實(shí)驗(yàn)完畢后，打掃儀器室桌面與地面清潔，保持桌面整潔。
    3） 儀器使用記錄
    記錄當(dāng)天的儀器使用情況于指定記錄本上，包括儀器使用起止時(shí)間與出現(xiàn)問題的解決方案，并簽上操作者的名字.